Як і у випадку використання будь-якого наукового інструменту, перед тим, як використовувати його для аналізу зразка, потрібно переконатися, що інструмент справно працює. Перевірка реакції приладу на відомий зразок підтверджує, що прилад правильно відкалібрований. Спектрофотометри вимагають періодичної калібрування для забезпечення правильної реакції приладу. Інфрачервоні (ІЧ) спектрофотометри використовують полістирол як стандарт калібрування. Сканування приладу з шматочком полістиролу в тримачі для зразків перевірить наявність піків, що спостерігаються в ІЧ-спектрах, та відносної інтенсивності піків.
Увімкніть спектрофотометр і дайте йому нагрітися щонайменше 10 хвилин. Час прогріву потрібно для стабілізації джерела. Без стабільного джерела ви не можете розраховувати на отримані спектри. Аналітичний сигнал покладається на ослаблення випромінювання джерела зразком.
Запустіть стандарт калібрування, помістивши шматочок полістирольної плівки в тримач для зразків. Без пробного запуску з використанням зразка відомих спектрів, званого еталоном, ви не знаєте, що спектрофотометр працює правильно.
Отримайте спектри для зразка полістиролу. Порівняйте спектри із спектром у стандартному посиланні ІЧ-спектрів. Переконайтесь, що всі очікувані піки існують на тестових спектрах. Розташування піків повинно відповідати довжині хвилі поглинання.
Перевірте спектри, щоб переконатися, що сила сигналу в межах 95 відсотків від максимальної для найсильнішого піку. Якщо найсильніший пік у спектрах більший або менший, ніж повномасштабний, відрегулюйте ослаблення для забезпечення правильної сили сигналу.
Часто калібрують ІЧ-спектрофотометр. Мінімальна частота калібрування повинна включати сканування безпосередньо перед роботою та відразу після роботи протягом дня.