Зміст
Виділення бактерій з ґрунту - важливий перший крок у багатьох експериментах з мікробіології. Після їх виділення бактерії можуть бути додатково проаналізовані для визначення речей, таких як їх види та їхня функція в ґрунтовому середовищі. Навіть невелика кількість ґрунту може містити мільйони бактерій, що обумовлює необхідність розведення ґрунтового зразка перед виділенням бактерій із зразка.
Відміряйте 100 мл. дистильованої води в градуйованому балоні і додайте її в стерильну пляшку.
Відважте 1 г зразка ґрунту і додайте його в пляшку з дистильованою водою.Щільно закрийте пляшку і струсіть її, щоб ретельно перемішати розчин.
Позначте стерильні пробірки "10 ^ -3", "10 ^ -4", "10 ^ -5" та "10 ^ -6." Додайте по 9 мл дистильованої води в кожну пробірку, використовуючи одну з піпеток.
Перенесіть 1 мл розчину у флакон у пробірку з написом "10 ^ -3", використовуючи нову піпетку. Закрийте пробірку і обережно закрутіть, поки розчин добре не змішається.
Перенесіть 1 мл розчину в пробірку "10 ^ -3" у пробірку "10 ^ -4" новою піпеткою. Закрийте трубку "10 ^ -4" і закрутіть, щоб перемішати. Повторіть цей метод, щоб перенести розчин з пробірки "10 ^ -4" в трубку "10 ^ -5", а потім з трубки "10 ^ -5" в трубку "10 ^ -6".
Накладіть по три зразки кожен з пробірок "10 ^ -4", "10 ^ -5" та "10 ^ -6". За допомогою нової піпетки перенесіть 1 мл розчину з пробірки в тарілку Петрі. Додайте в тарілку близько 15 мл поживного агару; потім поставте кришку на тарілку і обережно закрутіть, щоб агар покрив дно тарілки.
Складіть контрольну тарілку, помістивши 1 мл дистильованої води в тарілку Петрі, використовуючи нову піпетку. Додати агар; поставте кришку і закрутіть тарілку.
Залиште тарілки Петрі вертикально, поки агар не встановиться. Потім переверніть пластини та інкубуйте їх - або в інкубаторі, або при кімнатній температурі - протягом всього 24 годин та до п’яти днів.
Вийміть пластини з інкубатора після бажаного часу інкубації. Порахуйте бактеріальні колонії на пластинах, що містять приблизно від 30 до 300 колоній. Використовуйте постійний маркер для позначення вже підрахованих колоній, щоб уникнути підрахунку одних і тих же колоній двічі.
Розподіліть кількість колоній, що підраховуються шляхом розведення - "10 ^ -4", "10 ^ -5" або "10 ^ -6" - ґрунтового розчину для кожної тарілки. Знайдіть кількість вирощуваних бактерій у вихідному грамі ґрунту, усереднюючи результати з кожної лічильної пластини.