Зміст
Кишкова паличка, кишкова паличка - бактерія, яка росте в нижніх кишках ссавців. Цю бактерію вперше виявили наприкінці 1800-х. З тих пір вона мала довгу історію використання в наукових дослідженнях. Це найбільш широко використовуваний організм у молекулярній генетиці. Частина причини, чому кишкова паличка зазвичай використовується в наукових дослідженнях, полягає в тому, що її легко вирощувати в лабораторії. Факторами, які полегшують вирощування кишкової палички, є її прості харчові потреби, швидкі темпи зростання та помірні потреби у догляді.
Стерилізуйте прищеплювальну петлю, помістивши її у полум'я пальника Бунзена. Проведіть нижню половину петлі через полум’я, поки вона не світиться червоною.
Дайте петлі охолонути. Ви можете доторкнутися до стерильного агару на тарілці, щоб переконатися, що він охолонув. Не кладіть петлю на стіл і не допускайте контакту з чим-небудь, крім стерильного агару або потрібної культури, тепер, коли він був стерилізований.
Занурте петлю в культуру кишкової палички і потім видаліть її.
Відкрийте пластину агару і обережно просуньте петлю вперед-назад по поверхні одного ділянки агару. Слідкуйте за тим, щоб не дряпатися через агар з петлею. Агар забезпечує поживні речовини, необхідні для вирощування кишкової палички.
Поставте петлю в полум’я пальника Bunsen, щоб стерилізувати її. Як тільки петля охолоне, торкніться її до стерильної частини тарілки, щоб переконатися, що вона прохолодна, а потім просуньте петлю по першій смузі, щоб зробити другу смугу. Ця друга смуга є розведеною версією першої смуги. Повторіть цей процес стерилізації та ковзання до тих пір, поки декілька ділянок агарової пластини не просунуться. Причиною цього ви є те, що ви зможете пізніше вибирати з поодиноких клонічних колоній. Це допоможе переконатися, що у вас є принаймні одна секція, яка має окремі колонії-- не надто концентровані (що матиме занадто великий ріст і не дозволять вам вибирати з однієї колонії) і не надто розріджуються (що не дасть колоній) .
Стерилізуйте петлю на полум'ї востаннє перед тим, як відкласти її в робочу зону.
Покладіть верх назад на тарілку з агаром. Переверніть тарілку догори дном і помістіть її в інкубатор, встановлений на 37 градусів Цельсія (98,6 градусів за Фаренгейтом). Ця ідеальна температура інкубації імітує температуру тіла людини, де мешкає кишкова паличка. Протягом 24–48 годин на пластині агару з’являться видимі колонії бактерій кишкової палички.