Агар - желеподібна речовина, що отримується з очищених клітинних стінок червоних водоростей.Він додається до мікробіологічних середовищ, що є матеріалами, на яких вирощують мікроорганізми в лабораторіях, щоб надати речовині більш міцну структуру. Агар не має поживної цінності, тому, коли вчені використовують його для культивування мікроорганізмів, вони додають різні поживні речовини для посилення росту бактерій у чашках Петрі або пробірках. Коли дослідники зберігають бактерії в пробірці, це називається косою агару, оскільки рідина для росту рідини твердне, поки пробірка знаходиться в нахиленому положенні. Верхівка на гвинтовій кришці запобігає висиханню агару.
Засіб готується по-різному для косинок, ніж чашки Петрі. Стерилізація проводиться агаром у пробірках; чашки Петрі попередньо стерилізують перед тим, як влити в них стерилізований агар. Виміряйте необхідну кількість води і покладіть її в колбу Ерленмайєра. Нагрійте його на плиті, поки вона майже не закипить. Додайте інші інгредієнти, якщо потрібно, і перемішуйте суміш повільно і постійно, поки вони не розчиняться. Ці інгредієнти можуть включати буфер з екстрактом яловичини, пептоном та pH, залежно від типу мікроорганізму, який культивується.
Перш ніж додати порошок зневодненого агару, змішайте його з невеликою кількістю холодної дистильованої води, щоб запобігти грудочки. Будьте обережні, додаючи агар до гарячої рідини, оскільки він може пінитися і переповнювати горщик. Додайте невелику кількість агару за один раз і перемішайте, щоб рівномірно розподілити агар. Вимикайте тепло, коли суміш починає паритися, перш ніж вона закипить.
Покладіть незакриті пробірки на стійки пробірки. Наповніть пробірки, переносячи з горщика приблизно 5 мілілітрів - приблизно 0,17 унції або 1 чайну ложку - розплавленого агару з горщика. Кожну пробірку вільно закрийте, оскільки агар не буде стерилізований, якщо вони герметично закриті. Стерилізуйте всі пробірки в автоклаві близько 25 хвилин при 121 градусах Цельсія, або 250 градусах за Фаренгейтом.
Коли агар все ще гарячий, обережно нахиліть стійку, утримуючи пробірки на твердій поверхні або товстій книжці, переконайтесь, що середовище всередині пробірки знаходиться в похилому положенні відносно пробірки. Дайте середовищу охолонути і затвердіти під цим кутом, що збільшує площу поверхні агару. Затягніть кришки пробірки після охолодження агару. Склади готові до використання після затвердіння агару. Вони можуть зберігатися при кімнатній температурі або в холодильнику для подальшого використання.
Інокулюйте нахил, переносячи клітини за допомогою прищепного циклу з одноколонійного мікроорганізму на пластині до поверхні коси. Перемістіть петлю по всій поверхні косого і зафіксуйте трубочки. Інкубуйте нахил, поки не з’являться ознаки зростання, потім поставте пробірку в холодильник.